人ELISA檢測試劑盒試驗操作程序檢驗結(jié)果
　　
　　人ELISA檢測試劑盒樣本要求
　　
　　人ELISA檢測試劑盒樣本類型和采集
　　
　　以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
　　
　　1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在-20℃以下，避免反復凍融。
　　
　　2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復凍融。
　　
　　3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。
　　
　　人ELISA檢測試劑盒操作程序
　　
　　1、所有試劑和組分都先恢復到室溫，標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復孔。
　　
　　2、按前面試劑準備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
　　
　　3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
　　
　　4、設置標準品孔、樣本孔和空白孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，樣本孔加待測樣本50μL，空白孔不加。
　　
　　5、除空白孔外，標準品孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL。
　　
　　6、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
　　
　　7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。
　　
　　8、如此重復4次（共洗板5次）。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。
　　
　　9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
　　
　　10、所有孔加入終止液50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD值）。